PCR para a hepatite C

O VHC normalmente está ausente no material.

Ao contrário dos métodos sorológicos de diagnóstico da hepatite C viral, que detectam anticorpos para o VHC, a PCR permite detectar a presença do RNA do VHC diretamente e quantificar sua concentração no material de teste. O teste tem especificidade de espécie e alta sensibilidade: dez moléculas de RNA do VHC no material de teste são suficientes para detectá-lo. A detecção de anticorpos para o VHC apenas confirma o fato da infecção do paciente, mas não permite julgar a atividade do processo infeccioso (replicação do vírus) e o prognóstico da doença. Além disso, os anticorpos para o VHC são detectados tanto no sangue de pacientes com hepatite aguda e crônica, quanto naqueles pacientes que estavam doentes e se recuperaram, e frequentemente os anticorpos no sangue aparecem apenas vários meses após o início do quadro clínico da doença, o que complica o diagnóstico. A detecção do VHC no sangue usando PCR é um método diagnóstico mais informativo. A detecção do RNA do VHC na PCR indica viremia, permite julgar a replicação do vírus no corpo e serve como um dos critérios para a eficácia da terapia antiviral. A detecção do RNA do VHC por PCR em estágios iniciais da infecção viral, na ausência completa de quaisquer marcadores sorológicos, pode servir como a evidência mais precoce da infecção. No entanto, a detecção isolada do RNA do VHC na ausência completa de quaisquer outros marcadores sorológicos não pode excluir completamente um resultado falso-positivo de PCR. Nesses casos, é necessária uma avaliação abrangente de estudos clínicos, bioquímicos e morfológicos, com múltiplas confirmações repetidas da presença de infecção por PCR.

O uso do método de PCR em pacientes com hepatite C viral crônica é de grande importância, visto que a maioria deles não apresenta correlação entre a presença de replicação viral e a atividade das enzimas hepáticas. Nesses casos, somente a PCR permite avaliar a presença de replicação viral, especialmente se o resultado final for expresso quantitativamente. Na maioria dos casos da doença, o desaparecimento do RNA do VHC do soro sanguíneo ocorre posteriormente à normalização das enzimas hepáticas, portanto, sua normalização não pode servir de base para a interrupção do tratamento antiviral.

Na prática, é importante examinar não apenas o soro sanguíneo, mas também linfócitos e amostras de hepatobiópsia usando o método de PCR para detectar o RNA do VHC. Os vírus podem ser detectados 2 a 3 vezes mais frequentemente no tecido hepático do que no soro sanguíneo. Ao avaliar os resultados de um teste de soro sanguíneo para RNA do VHC, deve-se lembrar que a viremia pode ser flutuante (assim como alterações na atividade enzimática). Portanto, após resultados positivos no teste de PCR, um resultado negativo pode ser obtido e vice-versa. Nesses casos, é melhor examinar as amostras de hepatobiópsia para esclarecer quaisquer dúvidas que possam surgir.

A detecção do RNA do VHC em material usando PCR é usada para os seguintes propósitos:

• resolução de resultados questionáveis de testes sorológicos;
• diferenciação da hepatite viral C de outras formas de hepatite;
• identificação do estágio agudo da doença em comparação com a infecção ou contato anterior; determinação do estágio da infecção de recém-nascidos de mães soropositivas para o VHC;
• monitorar a eficácia do tratamento antiviral.

Pacientes com suspeita de hepatite viral C:

• doadores;
• pessoas com fatores de risco;
• indivíduos com atividade ALT elevada;
• pacientes com hepatite aguda

Todas as características acima mencionadas da avaliação de resultados e abordagens para o diagnóstico do VHC usando PCR também se aplicam a outras infecções.

O método de PCR permite não apenas detectar o RNA do VHC no material em estudo, mas também estabelecer seu genótipo. A determinação do genótipo viral é de grande importância para a seleção de pacientes com hepatite C viral crônica para tratamento com interferon-alfa e ribavirina. As indicações laboratoriais para o tratamento da hepatite C viral crônica com interferon-alfa são as seguintes:

• aumento da atividade das transaminases;
• presença de RNA do VHC no sangue;
• Genótipo 1 do VHC;
• alta viremia no sangue (mais de 8×10 ⁵ cópias/ml).

Atualmente, é possível determinar quantitativamente o conteúdo de RNA do VHC no soro sanguíneo usando o método de PCR, que é de grande importância para o monitoramento do tratamento com interferon alfa. O nível de viremia é avaliado da seguinte forma: com conteúdo de RNA do VHC de 10 ² a 10 ⁴ cópias/ml - fraco; de 10 ⁵ a 10 ⁷ cópias/ml - médio; acima de 10 ⁸ cópias/ml - alto. Com o tratamento eficaz, o nível de viremia diminui.

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