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Sauzern-blot
Médico especialista do artigo
Última revisão: 23.04.2024
Southern Blot (desenvolvido por E. Southern e R. Davies em 1975) é o principal método pelo qual os genes de uma determinada doença estão sendo identificados. Para isso, o DNA das células do paciente é extraído e processado com uma das endonucleases de restrição (ou várias). Os fragmentos resultantes são submetidos a eletroforese, o que lhes permite dimensionar o tamanho (fragmentos menores movem-se mais rapidamente através dos poros do gel). Em seguida, os fragmentos são transferidos (reimpressos) para um filtro de nitrocelulose, sobre o qual a sonda radiomarcada está em camadas. A sonda liga-se apenas à sequência complementar. Então, pelo método de autorradiografia, determina-se a posição do fragmento desejado de DNA genômico no eletroforese.
A hibridação com as preparações de ARN de sonda de ADN ou de ADN marcadas, gotejamento infligidos na matriz sólida, sem restrição antes e electroforese é chamado de ponto de hibridação e ranhura, dependendo da configuração dos locais de ADN no filtro (redonda ou alongada, respectivamente).
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