Testes para o papilomavírus humano: como fazer, descodificação

O papilomavírus humano representa uma séria ameaça. O diagnóstico é necessário para determinar a cepa da infecção e o risco de sua oncogenicidade. Essas informações nos permitem criar o plano de tratamento mais adequado e eficaz.

Diagnósticos de alta qualidade são realizados por vários especialistas simultaneamente. As principais indicações para o exame do corpo são:

• Vida sexual ativa e troca frequente de parceiros sexuais.
• Coceira, queimação na região genital, corrimento atípico.
• Aparecimento de novos crescimentos na pele e nas mucosas na forma de papilomas, verrugas e condilomas.

O diagnóstico do papilomavírus consiste em um complexo de métodos laboratoriais e instrumentais:

• Exame visual e coleta de anamnese – o médico examina as áreas afetadas e pergunta quando a erupção cutânea ou outros sinais de HPV surgiram. Avalia o tipo e o formato das neoplasias. Se houver crescimentos anogenitais, são realizados um exame do colo do útero e uma uretroscopia.
• Citologia de esfregaços e raspados – realizada para estabelecer alterações morfológicas em nível celular associadas ao HPV. A precisão deste método depende da técnica de coleta do material e da qualificação dos técnicos de laboratório.
• A colposcopia é um exame da mucosa para detectar formas subclínicas de infecção. O diagnóstico é confirmado pela presença dos seguintes fatores: leucoplasia, mosaico, puntura e zona de transformações anormais.
• A biópsia consiste na remoção de uma pequena quantidade de tecido afetado para exame microscópico. Geralmente, é realizada quando há suspeita de envolvimento cervical.
• Exame histológico – o material obtido como resultado da biópsia é enviado para estudo laboratorial para identificar condições pré-cancerosas e outras anormalidades celulares.
• PCR – é realizada para identificar tipos individuais de HPV. Sangue, urina, muco e outros fluidos teciduais são usados para o diagnóstico.
• O teste Digene é um dos métodos diagnósticos mais confiáveis. Possui alta sensibilidade ao papilomavírus humano. Permite determinar o genótipo e sua pertença ao grupo de alta ou baixa oncogenia.

Hoje, existem muitos métodos que permitem detectar a infecção pelo HPV e determinar o grau de sua agressividade.

Triagem para papilomavírus humano

Um teste obrigatório para pacientes com predisposição a processos malignos no corpo é o rastreio. O papilomavírus humano também é um motivo para se submeter a este exame laboratorial.

O primeiro rastreio é recomendado para mulheres a partir dos 30 anos. O exame é necessário para detectar não só o papilomavírus, mas também para prevenir lesões erosivas do colo do útero associadas ao HPV.

Na maioria das vezes, os seguintes tipos de triagem são prescritos aos pacientes:

• Exame citológico de Papanicolau – uma raspagem cervical colocada em meio líquido é utilizada para o estudo. Ele ajuda a identificar cepas oncológicas de HPV em um estágio inicial de desenvolvimento.
• Estendido – identifica genótipos com alta oncogenicidade e sua concentração no corpo.
• A reação em cadeia da polimerase tem alto valor diagnóstico, pois permite identificar todos os tipos de papilomavírus humano.

O rastreamento do HPV é realizado tanto durante o diagnóstico da doença quanto durante a terapia e para avaliar os resultados do tratamento.

Teste de papilomavírus humano

Em caso de suspeita de papilomavírus, todos os pacientes recebem um conjunto de procedimentos diagnósticos. A análise do HPV consiste na determinação do tipo de vírus em laboratório. Diversos fluidos e tecidos biológicos são utilizados para o estudo.

Na maioria das vezes, um esfregaço dos genitais é coletado para análise. A coleta de material dessa área é necessária mesmo na ausência de sintomas visuais de papilomatose. A biópsia resultante é examinada ao microscópio em busca de células epiteliais alteradas pelo vírus. Com base nos resultados diagnósticos, são determinados o tipo de infecção e o risco de sua oncogenicidade.

É obrigatório fazer um teste para infecção papilomatosa ao planejar uma gravidez, para determinar as causas da infertilidade e as patologias da gestação. Nesse caso, o teste é prescrito para ambos os parceiros simultaneamente. Isso se deve ao fato de o vírus ser transmitido durante o contato íntimo. Com base nos resultados do estudo, o médico pode prescrever métodos diagnósticos adicionais e elaborar um plano de tratamento.

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Análise quantitativa para o papilomavírus humano

Para detectar o papilomavírus, determinar seu tipo e grau de atividade, é realizada uma análise quantitativa. Existem vários métodos para determinar o HPV, vamos considerá-los:

1. A reação em cadeia da polimerase (PCR) é o padrão para o diagnóstico do HPV. A análise se baseia na multiplicação do número de cópias do DNA viral em uma biópsia. Este método permite a detecção de até mesmo um único tipo do vírus com alta precisão.
2. Teste Digene – a peculiaridade deste método é a detecção confiável de genótipos com alta oncogenicidade. Diversos fluidos e materiais biológicos são utilizados para análise.
3. Determinação da presença de anticorpos virais - a análise revela proteínas específicas do sistema imunológico. Cada agente viral que entra no corpo promove a produção de imunoglobulinas específicas. Se forem detectados anticorpos contra o papilomavírus humano no soro sanguíneo, isso indica infecção do corpo.

Para realizar uma análise quantitativa, são utilizados sangue capilar (de um dedo), raspados de pele e mucosas e biópsias de tecido. 12 horas antes da realização dos exames, você deve interromper o uso de medicamentos antifúngicos, antivirais, antimicrobianos e outros, incluindo anticoncepcionais. No dia do diagnóstico, você precisa tomar banho e lavar bem as áreas íntimas, caso sejam retiradas raspados. Além disso, 2 a 3 dias antes do procedimento, você deve evitar relações sexuais.

O médico assistente interpreta os resultados obtidos. O médico leva em consideração não apenas os dados dos diagnósticos realizados, mas também as manifestações clínicas da doença. Caso contrário, os resultados podem ser mal interpretados.

DNA do papilomavírus humano, PCR

Um dos métodos mais comuns e confiáveis para detectar o DNA do papilomavírus humano é a PCR. Diversos materiais biológicos são utilizados para conduzir a reação em cadeia da polimerase: sangue, urina, esfregaços de mucosa e líquido amniótico. A análise permite estabelecer a presença de infecção, mesmo que latente no organismo.

O princípio deste método diagnóstico baseia-se no isolamento de DNA humano e viral. Qualquer ácido desoxirribonucleico é composto por quatro nucleotídeos:

• A – adenina.
• T – timidina.
• G – guanina.
• C – citosina.

De acordo com as regras da genética, eles têm uma certa ordem de combinação: A+T, G+C. Todos os organismos vivos têm seu próprio DNA, que pode ser isolado. A PCR reconhece fragmentos de DNA patogênico, isolando assim o patógeno.

Vantagens da PCR:

1. Universalidade – além do papilomavírus humano, muitos outros patógenos de doenças infecciosas podem ser detectados durante o estudo.
2. Alta sensibilidade – além de determinar a presença do vírus, o método determina seu tipo e outras características.
3. Eficácia – identifica de forma confiável a infecção necessária.
4. Velocidade – os resultados do teste podem ser obtidos dentro de 24 horas após a realização do teste.

Preparação para análise:

• Você deve parar de tomar pílulas anticoncepcionais uma semana antes do teste agendado, pois elas podem interferir nos resultados.
• O estudo não é realizado durante a menstruação e por 3 dias após ela.
• Você deve evitar relações sexuais dois dias antes do teste.
• O diagnóstico é realizado em jejum, com a última refeição sendo realizada 12 horas antes da análise. No entanto, você pode beber água.
• No dia da realização do teste PCR para HPV, não é recomendado realizar procedimentos de higiene nem ir ao banheiro para urinar duas horas antes da coleta do material.

Os resultados obtidos devem ser interpretados por um médico. Um indicador de até 3 Lg é uma concentração insignificante do patógeno, 3-5 Lg é uma concentração clinicamente significativa e mais de 5 Lg é alto. Normalmente, todos os títulos quantitativos devem ser negativos. Mas resultados negativos nem sempre indicam a ausência da doença. Isso é frequentemente observado com concentrações insignificantes do vírus no corpo e quando ele é suprimido pelo sistema imunológico.

Apesar de todas as vantagens, a PCR apresenta uma série de desvantagens. A análise deve ser realizada apenas em um laboratório moderno para evitar resultados falsos. Atenção especial deve ser dada à coleta do material. Somente um médico deve decifrar os resultados, pois resultados positivos podem ocorrer após tratamento recente de uma infecção.

Raspagem para papilomavírus humano

Para detectar a infecção genital por HPV em homens, é realizado um raspado, ou seja, um teste Digene. O material é coletado do canal uretral com uma escova especial; em alguns casos, o tecido é retirado da cabeça do pênis. Antes de fazer o teste, você deve tomar banho e se lavar bem. A violação da higiene pessoal afeta negativamente os resultados do teste.

Nas mulheres, uma raspagem é feita do colo do útero em caso de suspeita de displasia, erosão e outros processos patológicos causados pelo HPV. Para coletar o material, o médico remove o corrimento vaginal e insere uma pequena escova no órgão, girando-a em torno do eixo do canal cervical. Após todas as manipulações, a escova é colocada em um tubo de ensaio com meio e enviada ao laboratório.

Os materiais obtidos são enviados para diagnóstico diferencial pelo método PCR; não é realizada triagem citológica. Os resultados ficam prontos 2 a 3 dias após a análise. Os dados obtidos representam informações completas sobre o tipo de vírus, sua carcinogenicidade e uma série de outros fatores no curso da doença. Se os resultados estiverem incorretos, o estudo é realizado novamente. A triagem repetida é necessária durante o tratamento e após a terapia para determinar sua eficácia.

Esfregaço para papilomavírus humano

Se verrugas ou condilomas forem encontrados na área genital durante um exame ginecológico, o médico coleta um esfregaço para HPV. O médico passa uma escova especial sobre os tecidos afetados. O esfregaço é coletado do canal cervical nas mulheres e da uretra nos homens. A biópsia coletada é enviada ao laboratório para análise.

Os seguintes tipos de esfregaços são usados quando há suspeita de papilomavírus humano:

• PCR – detecta o DNA da infecção. Para realizar essa análise, é coletado um raspado da uretra nos homens e da vagina e do canal cervical nas mulheres. Sêmen ou urina também podem ser utilizados.
• O teste Digene é um estudo do material coletado em nível molecular. O teste diferencia dois grupos de infecções por papiloma ao mesmo tempo — com alta e baixa oncogenicidade.

Os estudos acima classificam os resultados em 5 tipos:

1. Ausência de células atípicas.
2. Presença de células alteradas devido ao processo inflamatório.
3. Número mínimo de células com estrutura atípica.
4. Células malignas.
5. Um grande número de células oncogênicas.

Há também uma classificação de acordo com o sistema Bethesda. Ela consiste em indicadores de baixo e alto grau de alteração. Neste caso, a decodificação do esfregaço é apresentada pelos seguintes dados:

• NILM – epitélio normal.
• ASCUS – células alteradas devido à displasia, inflamação, infecção sexualmente transmissível ou HPV.
• ASC-H – foram detectadas anormalidades na estrutura do epitélio escamoso. Este resultado indica estágios iniciais de oncologia ou displasia grave.
• LSIL – um pequeno número de células alteradas está presente no esfregaço. Indica displasia ou papilomavírus.
• HSIL – alterações significativas no epitélio. Displasia grave e oncologia pronunciada. Se este resultado for ignorado, 7% dos pacientes desenvolverão uma doença maligna em 3 a 5 anos.
• AGC é um epitélio glandular atípico. Ocorre em casos de câncer uterino ou displasia.
• AIS – estágios iniciais da oncologia.
• SIL de alto grau – carcinoma de células escamosas.

A velocidade de obtenção dos resultados do esfregaço depende do método de pesquisa escolhido. Em geral, a decodificação fica pronta em 2 a 3 dias.

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Anticorpos para o papilomavírus humano

Para detectar anticorpos contra o HPV, é indicado um ensaio imunoenzimático de sangue. O princípio deste estudo é determinar a presença de imunoglobulinas contra o agente infeccioso. O diagnóstico pelo método ELISA indica a resposta imunológica do organismo ao vírus. Dependendo dos anticorpos detectados, distinguem-se os seguintes estágios da doença:

• IgM – aguda.
• IgG – período crônico ou de recuperação.
• IgA – recidiva de infecção crônica.

Os resultados do teste de anticorpos ficam prontos de 1 a 3 dias após a coleta. Ao decifrar os resultados, deve-se levar em consideração que o papilomavírus humano pode ser um traço indireto; portanto, PCR e outros testes são realizados para esclarecer a presença de infecção. Além disso, o ELISA não estabelece o genótipo ou o risco de carcinogenicidade do vírus.

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