Exame microbiológico da expetoração

O exame microbiológico é o elo mais importante na busca diagnóstica e na verificação do agente causador da pneumonia. Envolve não apenas o isolamento do agente causador, mas também o estudo de suas propriedades, incluindo a sensibilidade a diversos medicamentos com ação bactericida e bacteriostática.

Para tanto, utiliza-se o método de semeadura de escarro em diversos meios nutrientes. De uma amostra de escarro entregue ao laboratório, os nódulos purulentos são selecionados e cuidadosamente lavados em uma placa de Petri com uma solução isotópica de cloreto de sódio, o que, em certa medida, permite sua remoção da microflora do trato respiratório superior. A semeadura de nódulos purulentos de escarro é realizada em diversos meios nutrientes, cuja composição é descrita em manuais especiais de microbiologia. Os meios com os nódulos são incubados a 37,5 °C por 24 horas. Culturas puras são isoladas das colônias cultivadas, identificadas por métodos microbiológicos conhecidos e sua sensibilidade a antibióticos é determinada.

Para determinar o conteúdo quantitativo de microrganismos, o escarro é homogeneizado, misturado com caldo nutriente, e diluições décuplas sucessivas são preparadas a partir da mistura, que são inoculadas em placas de Petri com ágar sangue. Após 24 horas de incubação a 37,5 °C, os resultados são levados em consideração, contando colônias do mesmo tipo em aparência e levando em consideração o grau de diluição do material. Esfregaços são preparados a partir das colônias e examinados ao microscópio.

Interpretação dos resultados

A interpretação dos resultados do exame microbiológico do escarro é bastante complexa, o que se explica por uma série de fatores. Já foi mencionado acima sobre a constante contaminação do conteúdo brônquico com a microflora do trato respiratório superior e da cavidade oral e a presença frequente no conteúdo traqueobrônquico normal de pessoas saudáveis da maioria dos agentes causadores mais típicos de doenças respiratórias (pneumococos, estreptococos, estafilococos, etc.). Nesse sentido, o isolamento no escarro durante estudos microbiológicos de uma associação de vários microrganismos, a maioria dos quais neste caso particular são oportunistas, torna extremamente difícil estabelecer o agente causador da doença. Portanto, para interpretar os resultados do exame microbiológico do escarro, é necessário levar em consideração a predominância quantitativa de um tipo específico de bactéria (mais de ¹⁰⁶ -107 ^mc /ml), o aparecimento de certos microrganismos na fase de exacerbação e seu desaparecimento durante o período de remissão. É muito importante levar em consideração o quadro clínico da doença.

Os principais e possíveis agentes causadores de várias formas clínicas de pneumonia

Forma clínica da pneumonia	Principais patógenos	Possíveis patógenos
Cruposo	Pneumococos	Estreptococos, Klebsiella
Pós-influenza	Estafilococos, pneumococos, klebsiella	Haemophilus influenzae, estreptococos
Abscesso	Estafilococos, bacteroides, flora mista	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspiração	Bacteroides, estreptococos anaeróbicos	Estafilococos, pneumococos
Pós-operatório	Estafilococos	Pneumococos, Klebsiella
Intersticial	Micoplasmas	Patógenos da ornitose, psitacose
Pneumonia secundária em pacientes hospitalizados sem terapia antibacteriana prévia	Estafilococos, pneumococos, klebsiella, bacteroides	Escherichia coli, serratia, etc.
Pneumonia secundária desenvolvida no contexto da terapia antibacteriana	Microrganismos patogênicos facultativos	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus, etc.
Em pacientes com bronquite crônica	Pneumococos, Haemophilus influenzae	Estafilococos, estreptococos
Em pacientes com alcoolismo	Pneumococos, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, protozoários
Na síndrome da imunodeficiência adquirida	Pneumocystis, fungos	Citomegalovírus
Em pacientes cujos cuidados são prestados por pessoas de fora	Pneumococos, estafilococos, papila hemofílica	Klebsiella, Escherichia coli

Ao avaliar quantitativamente os resultados do estudo de contaminação microbiana em pacientes com pneumonia, é necessário lembrar a altíssima sensibilidade desse indicador à prescrição de antibióticos. Mesmo o tratamento de curto prazo com antibacterianos pode levar a uma redução acentuada da contaminação microbiana, o que não permite uma avaliação adequada dos resultados do estudo do escarro. Portanto, é aconselhável coletar escarro antes de prescrever antibióticos.

Deve-se observar também que meios nutritivos seletivos especiais são utilizados para cultivar patógenos intracelulares de pneumonia (micoplasma, legionella, clamídia, rickettsia). Testes microbiológicos de rotina utilizando meios nutritivos convencionais (ágar-ágar) nunca apresentam resultados positivos. Portanto, a escolha de métodos específicos de teste microbiológico deve ser realizada com a participação do médico assistente, que é obrigado a informar o médico do laboratório sobre suas suspeitas quanto ao possível papel de patógenos intracelulares na ocorrência de pneumonia neste paciente.

Deve-se acrescentar que, na prática clínica, mesmo um exame microbiológico tecnicamente perfeito do escarro permite a identificação do patógeno em não mais que 40-60% dos casos. Portanto, outros métodos modernos de pesquisa podem ser utilizados para verificar o patógeno. O conteúdo informativo de um estudo bacteriológico pode ser significativamente aumentado utilizando aspirado traqueobrônquico, fluido obtido durante lavagem broncoalveolar (LBA), broncoscopia, etc., em vez de escarro, como material biológico a ser estudado.

Além disso, o método de imunofluorescência de diversos materiais biológicos (material de broncoscopia, sangue, conteúdo pleural, etc.), métodos de diagnóstico por PCR e o estudo do nível de anticorpos específicos no soro sanguíneo podem ser utilizados para identificar patógenos de pneumonia. Infelizmente, esses métodos diagnósticos ainda não encontraram ampla aplicação clínica e atualmente são utilizados apenas em grandes centros e laboratórios especializados.

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