Análise cariotípica

Um dos métodos de pesquisa citogenética que visa estudar os cromossomos é a cariotipagem. A análise tem várias indicações para a conduta, bem como vários tipos. 

Cariótipo é um conjunto de cromossomos humanos. Descreve todas as características dos genes: tamanho, quantidade e forma. Normalmente, o genoma é composto por 46 cromossomos, dos quais 44 são autossômicos, ou seja, são responsáveis por características hereditárias (cabelo e cor dos olhos, formato da orelha e outros). O último par são os cromossomos sexuais que determinam o cariótipo: mulheres 46XX e homens 46XU.

O processo de diagnóstico revela quaisquer violações do genoma:

• Mudanças na composição quantitativa.
• Violação da estrutura.
• Violação de qualidade

Como regra, a cariotipagem é realizada por um recém-nascido para determinar anomalias genéticas. A análise também é mostrada para casais que estão planejando uma gravidez. Neste caso, o estudo revela uma discrepância entre os genes, o que pode levar ao nascimento de uma criança com patologias hereditárias.

Tipos de cariotipagem molecular:

1. Alvo

Atribuído para confirmar várias anormalidades e síndromes. Permite determinar as causas da perda da gravidez: feto congelado, aborto, interrupção de acordo com as indicações médicas. Define a etiologia de um conjunto adicional de cromossomos com triploidias. A análise é realizada em microarrays com 350 mil marcadores, concentrados em áreas clinicamente significativas dos cromossomos. O poder de resolução deste estudo é de 1 milhão de pb.

2. Standard

Identifica violações no genoma de significado clínico. Diagnostica síndromes de microdeleção e patologias associadas a doenças autossômicas dominantes. Determina as causas de anormalidades cromossômicas em síndromes indiferenciadas em pacientes com anomalias de desenvolvimento, malformações congênitas, atraso no desenvolvimento psicomotor, autismo.

Permite revelar anomalias cromossômicas no período pré-natal. A técnica determina aneuploidia, microdeleções patológicas no feto. O estudo é realizado em um microarray com 750.000 marcadores de alta densidade, que cobrem todas as partes significativas do genoma. O poder de resolução da análise padrão do cariótipo é de 200.000 pb.

3. Expandido

Permite estabelecer as causas de anormalidades cromossômicas em síndromes indiferenciadas em crianças. Identifica deleções patogênicas, isto é, o desaparecimento de regiões cromossômicas e duplicação - cópias adicionais de genes. Diagnostica locais com perda de heterozigosidade, causas de patologias autossômicas recessivas.

A análise estendida de microarray cromossômico é realizada usando um microarray de alta densidade que contém mais de 2,6 milhões de marcadores individuais de alta densidade. O poder de resolução deste estudo permite cobrir todo o genoma e varia de 50.000 pb. Graças a isso, todas as seções do código genético são estudadas com a máxima precisão, o que torna possível revelar os menores distúrbios estruturais.

Via de regra, a análise do cariótipo é realizada de acordo com o objetivo do geneticista. Dependendo das indicações médicas, um dos tipos acima pode ser atribuído. Um estudo padrão custa menos, mas raramente é prescrito, porque não revela muitas anormalidades cromossômicas. A cariotipagem alvo é uma análise mais cara, por isso é prescrita na presença de sinais clínicos de síndromes e outras anomalias. Diagnóstico estendido é o mais caro e mais informativo, pois permite estudar completamente todos os 23 conjuntos de cromossomos.

Onde passar a análise no cariótipo?

Análise de micromatriz cromossômica é entregue como prescrito por um geneticista. O estudo visa estudar o genoma do paciente e revelar quaisquer anomalias em sua estrutura.

Os cromossomos são fitas de DNA, seu número e estrutura têm sua especificidade para cada espécie. O corpo humano contém 23 pares de cromossomos. Um par determina o sexo: nas mulheres 46XX cromossomos e nos homens 46XY. Os genes restantes são autossomos, isto é, não-genes.

Características de cariotipagem:

• A análise é realizada 1 vez, uma vez que o conjunto de cromossomos não muda ao longo da vida.
• Permite estabelecer as causas dos problemas reprodutivos nos cônjuges.
• Diagnostica múltiplas malformações em crianças.
• Identifica anomalias genéticas.

O cariótipo é dado em um laboratório médico especializado ou em um centro genético. O estudo é realizado por um médico qualificado. Por via de regra, os testes estão prontos dentro de 1-2 semanas. Os resultados são decifrados pelo geneticista.

Indicações para o procedimento análise de cariótipo

O procedimento de cariotipagem é atribuído a recém-nascidos para a detecção de anomalias genéticas e patologias hereditárias, bem como para homens e mulheres na fase de planejamento da gravidez. Há também várias outras indicações para a análise:

• Infertilidade masculina e feminina de origem desconhecida.
• Infertilidade masculina: oligozoospermia grave e não obstrutiva, teratozoospermia.
• Aborto espontâneo: abortos espontâneos, feto congelado, parto prematuro.
• Amenorréia primária.
• Casos de morte precoce de recém-nascidos em anamnese.
• Crianças com anormalidades cromossômicas.
• Crianças com múltiplas malformações congênitas.
• A idade dos pais é mais de 35 anos.
• Múltiplas tentativas frustradas de fertilização por fertilização in vitro.
• Doença hereditária em um dos futuros pais.
• Distúrbios hormonais em mulheres.
• Espermatogênese de etiologia desconhecida.
• Casamentos intimamente relacionados.
• Ambiente vivo ecológico desfavorável.
• Contato prolongado com produtos químicos, irradiação.
• Hábitos nocivos: fumo, álcool, drogas, dependência de drogas.

A cariotipagem de crianças é realizada em tais casos:

• Malformações congênitas.
• Retardo mental.
• Atraso no desenvolvimento psicomotor.
• Microanomalia e atraso no desenvolvimento da psico-fala.
• Anomalias sexuais.
• Violação ou atraso do desenvolvimento sexual.
• Retardo de crescimento.
• Prognóstico da saúde da criança.

O diagnóstico é recomendado para todos os cônjuges no estágio de planejamento da gravidez. Além disso, a análise pode ser realizada durante a gravidez, ou seja, pesquisa cromossômica pré-natal.

Como o cariótipo se parece?

A totalidade dos sinais de um conjunto completo de cromossomos é um cariótipo. Para a sistematização das análises cromossômicas, utiliza-se a Nomenclatura Citogenética Internacional, que é baseada na coloração diferencial do genoma para uma descrição detalhada de toda a cadeia do DNA.

O estudo revela:

• Trissomia - no par há um terceiro cromossomo extra.
• Monossomia - um par carece de um cromossomo.
• Inversão - a volta do genoma.
• Translocação é movimento de sites.
• A exclusão é a perda do site.
• Duplicação - duplicando o fragmento.

Os resultados da análise são registrados usando este sistema:

1. O número total de cromossomos e o conjunto de genitália são 46, XX; 46, XY.
2. Cromossomos extras e ausentes são indicados, por exemplo, 47, XY, + 21; 46, XY-18.
3. O braço curto do genoma é denotado pelo símbolo - p, e o longo - q.
4. A translocação é t, e a deleção é del, por exemplo, 46, XX, del (6) (p12.3)

A análise pronta para o cariótipo é a seguinte:

• 46, XX - a norma ou avalie a mulher.
• 46, XY é a norma de um homem.
• 45, síndrome de X - Shereshevsky-Turner.
• 47 XXY - síndrome de Klinefelter.
• 47, XXX - trissomia no cromossomo X.
• 47, XX (XY), +21 - sdrome de Down.
• 47, XY (XX), + 18 - sdrome de Edwards.
• 47, XX (XY), + 13 - a síndrome de Patau.

A pesquisa citogenética revela várias anomalias na estrutura das cadeias de DNA. A análise também diagnostica predisposições para muitas doenças: patologias endócrinas, hipertensão, lesões articulares, infarto do miocárdio e outras.

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Preparação

As células do sangue são utilizadas para a análise do cariótipo, portanto, é muito importante se preparar corretamente para o diagnóstico.

A preparação para a pesquisa cromossômica começa 2 semanas antes de ser tomada e consiste em excluir a influência sobre o corpo de tais fatores:

• Doenças agudas e crônicas.
• Recepção de medicamentos.
• Beber álcool e drogas, fumar.

Para a análise, o sangue venoso é usado em 4 ml. A amostragem de sangue é realizada com o estômago vazio.

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Técnica análise de cariótipo

O genoma humano não pode ser visto a olho nu, os cromossomos são visíveis apenas sob um microscópio em certas fases da divisão celular. Para determinar o cariótipo, são utilizados leucócitos unicelulares, fibroblastos da pele ou células da medula óssea. Para o estudo, as células são adequadas na metáfase da mitose. O fluido biológico é colocado em um tubo de ensaio com lítio e heparina. O sangue é cultivado por 72 horas.

Em seguida, a cultura é enriquecida com substâncias especiais, que impedem a divisão celular na fase necessária para o diagnóstico. Da cultura usam drogas no vidro, que estão sujeitas a investigação. Informações adicionais sobre o estado do genoma são obtidas por sua coloração. Cada cromossomo tem estriamento, que é claramente visível após a coloração.

Em um estudo cromossômico clássico, a coloração é realizada com vários corantes e suas misturas. O corante se liga a diferentes partes do genoma de maneira diferente, tornando a coloração desigual. Devido a isso, um complexo de marcas transversais é formado, o que reflete a heterogeneidade linear do cromossomo.

Métodos básicos de coloração:

• Q - dá imagens com alto detalhe. Este método foi chamado de coloração de Caspersson com acrichine-mostarda com diagnóstico sob um microscópio fluorescente. É usado para analisar o sexo genético, identificar translocações entre X e Y, Y e autossomos, e também para triagem de mosaicismo com cromossomos Y.
• G é um método modificado de Romanovsky-Giemsa. Tem uma maior sensibilidade em comparação com Q. Ele é usado como um método padrão de análise citogenética. Identifica pequenas aberrações, cromossomos marcadores.
• R - é usado para detectar regiões homólogas G e Q negativas. O genoma é tratado com corante alaranjado de acridina.
• C - analisa regiões centroméricas dos cromossomos com heterocromatina constitutiva e a verdadeira parte distal de Y.
• T - usado para analisar as regiões da fita de DNA telomérico.

As células coloridas e fixas são fotografadas ao microscópio. Do conjunto resultante de fotografias formam um conjunto numerado de pares de autossomos, ou seja, um cariótipo sistematizado. A imagem das fitas de DNA é orientada verticalmente, a numeração depende do tamanho, com um par de cromossomos sexuais cobrindo o conjunto.

As preparações de sangue são analisadas sob um microscópio de 20-100 placas metafásicas para detectar aberrações quantitativas e estruturais.

• As aberrações quantitativas são mudanças no número de genes. Semelhante é observado com a síndrome de Down, quando há um extra de 21 cromossomos.
• As aberrações estruturais são uma mudança nos próprios cromossomos. Isso pode ser uma queda do genoma, a transferência de uma parte para outra, uma rotação de 180 graus e mais.

A técnica de cariotipagem é um processo trabalhoso. O estudo é conduzido por especialistas altamente qualificados. Para diagnosticar o genoma de uma única pessoa, pode demorar um dia inteiro de trabalho.

Análise do cariótipo dos cônjuges

Quando se casam, muitos casais enfrentam o problema da concepção. A análise citogenética é mostrada para resolver problemas reprodutivos. A cariotipagem dos cônjuges permite revelar anomalias na estrutura do genoma, que interferem em ter filhos ou perturbar o processo de gestação. Alterar cariótipo é impossível, mas graças ao diagnóstico, você pode determinar as verdadeiras causas da infertilidade e aborto, encontrar maneiras de resolvê-los.

A análise de micromatriz cromossômica é realizada para detectar anormalidades na estrutura da estrutura e no número de fitas de DNA que podem causar doenças hereditárias em uma futura criança ou infertilidade dos cônjuges. Existem padrões internacionais para analisar futuros pais:

• Patologias cromossômicas no gênero, na família.
• Aborto espontâneo de uma gravidez em uma anamnésia.
• A idade da gestante é maior que 35 anos.
• Efeitos mutagênicos prolongados no corpo.

Até à data, esses métodos de cariotipagem são usados:

1. Análise de cromossomos nas células do sangue.

Permite identificar casos de infertilidade, quando a chance de ter um filho é significativamente reduzida ou completamente ausente de um dos cônjuges. A pesquisa também determina o risco de instabilidade do genoma. Para tratar anormalidades, os pacientes podem ser prescritos antioxidantes e imunomoduladores, que reduzem a falha da concepção.

O sangue venoso é levado para o estudo. A partir do fluido biológico, os linfócitos são isolados, que são estimulados em um tubo de ensaio, tratados com uma substância especial, corados e estudados. Por exemplo, com a síndrome de Klinefelter, que se manifesta como infertilidade masculina, há um cromossomo extra 47 XX no cariótipo. Além disso, mudanças estruturais no genoma podem ser identificadas: inversão, deleção, translocação.

2. Exame pré-natal.

Define patologias cromossômicas do feto nos estágios iniciais da gravidez. Tal estudo é necessário para o diagnóstico de doenças genéticas ou malformações que levam à morte fetal no útero.

Para realizar pesquisas, tais métodos podem ser usados:

• Não invasivo - seguro para a mãe e o feto. O diagnóstico é realizado com a ajuda do ultra-som de uma criança e uma análise bioquímica detalhada do sangue de uma mulher.
• Invasiva - biópsia do córion, cordocentese, placentocentese, amniocentese. Para a análise, células da placenta ou córion, líquido amniótico ou sangue do cordão umbilical são coletadas. Apesar da precisão do diagnóstico de alta, técnicas invasivas têm um risco aumentado de complicações, portanto, realizada somente sob indicações médicas estritas para detectadas durante a ultra-sonografia patologia fetal, nova mãe com mais de 35 anos de idade, os pais com anormalidades cromossômicas, alterações nos marcadores sanguíneos bioquímicos.

Para a pesquisa citogenética, não apenas o sangue, mas também a ejaculação podem ser usados. Este método é chamado Tunel e permite determinar uma das causas mais comuns de infertilidade masculina sob a condição de um normal cariótipo - fragmentação do DNA do esperma.

Se houver mutações genéticas ou aberrações cromossômicas em um dos cônjuges, o médico fala sobre possíveis riscos e a probabilidade de um filho com desvios. Uma vez que as patologias dos genes são incuráveis, a decisão posterior do casal é tomada de forma independente: usar material doador (espermatozóide, óvulo), risco de parir ou ficar sem filhos.

Se os desvios no genoma são detectados nos processos de gestação, tanto em mulheres quanto em embriões, os médicos recomendam que tais gestações sejam interrompidas. Isso se deve ao risco aumentado de nascimento de um bebê com desvios sérios e, em alguns casos, inconsistentes com a vida. Realizar a análise e decifrar seus resultados é feito por um geneticista.

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Exame de sangue para cariótipo

Mais frequentemente, a cariotipagem é realizada na análise do sangue venoso pela cultura de suas células. Mas, para realizar pesquisas citogenéticas, outro material biológico pode ser usado:

• Células do líquido amniótico.
• A placenta.
• Células de embriões.
• Material abortivo.
• Medula óssea.

O material que será levado para o diagnóstico depende da causa e da tarefa da análise. Um algoritmo aproximado para testes de sangue:

• Um pequeno volume de líquido por 72 horas é colocado em um meio nutritivo a uma temperatura de 37 ° C.
• Como os cromossomos são visíveis no estágio da metáfase da divisão celular, um reagente é adicionado ao meio biológico, o que interrompe o processo de fissão na fase necessária.
• A cultura celular é corada, fixada e analisada ao microscópio.

Análise de cariótipo de sangue proporciona uma detecção altamente precisa de quaisquer anomalias na estrutura das cadeias de ADN: intrachromosomal e intercromossômicas rearranjos, alterar a ordem dos fragmentos genómicos de ambos. O principal objetivo do diagnóstico é identificar doenças genéticas.

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Análise genética do cariótipo

O diagnóstico citogenético que visa estudar o tamanho, número e forma dos cromossomos é o cariótipo genético. A análise tem tais indicações para realizar:

• Identificação de defeitos congênitos.
• Risco de uma criança com patologias hereditárias.
• Suspeita de infertilidade.
• Violação do espermograma.
• Não intenção de gravidez.
• Elaboração de um plano para o tratamento de certos tipos de tumores neoplásicos.

Além disso, a análise genética para cariótipo é incluída na lista de obrigatórios para os cônjuges que planejam ter filhos.

Na maioria das vezes, o estudo revela tais patologias:

1. Aneuplodia é uma mudança no número de cromossomos, tanto no sentido de aumentar e diminuir. A violação do equilíbrio leva a abortos, o nascimento de bebês com patologias congênitas graves. A forma em mosaico da aneuploidia causa síndrome de Down, síndrome de Edwards e outras doenças muito incompatíveis.
2. Reconstrua o cariótipo - se as alterações forem balanceadas, o conjunto de cromossomos não será quebrado, mas será ordenado de forma diferente. Com mudanças desequilibradas, há uma ameaça de mutações genéticas, o que é especialmente perigoso para as gerações futuras.
3. A translocação é uma estrutura incomum de fitas de DNA, ou seja, a substituição de um fragmento do genoma por outro. Na maioria dos casos, é herdado.
4. A violação da diferenciação sexual é um distúrbio cromossômico extremamente raro, que nem sempre se manifesta por sintomas externos. O não cumprimento do sexo fenotípico pode ser uma das causas da infertilidade.

A análise do cariótipo é realizada em laboratórios genéticos, médicos qualificados em genética.

Análise cariotípica com aberrações

Aberrações são desordens na estrutura dos cromossomos, causadas por suas descontinuidades e redistribuição com perda ou duplicação de material genético. Cariotipagem com aberrações é um estudo que visa detectar quaisquer alterações na estrutura do genoma.

Tipos de aberrações:

• Quantitativo - uma violação do número de cromossomos.
• Estrutural - uma violação da estrutura do genoma.
• Regular - são determinados na maioria ou em todas as células do corpo.
• Irregular - surge devido ao impacto no corpo de vários fatores adversos (vírus, radiação, efeitos químicos).

A análise determina o cariótipo, suas características, sinais do impacto de vários fatores negativos. A investigação cromossômica com aberrações é realizada em tais casos:

• Infertilidade no casamento.
• Abortos espontâneos.
• Casos de natimorto na anamnese.
• Mortalidade infantil precoce.
• Gravidez congelada.
• Malformações congênitas.
• Violação da diferenciação sexual.
• Suspeitas de patologia cromossômica.
• Atraso mental, desenvolvimento físico.
• Exame antes da FIV, ICSI e outros procedimentos reprodutivos.

Ao contrário da cariotipagem clássica, essa análise leva mais tempo para ser mantida e custa mais.

Análise cariotípica para uma criança

Segundo as estatísticas médicas, as patologias congênitas desempenham um papel significativo nas causas da mortalidade infantil. Para a detecção oportuna de anormalidades genéticas e doenças hereditárias, a criança é analisada quanto ao cariótipo.

• Na maioria das vezes, as crianças são diagnosticadas com trissomia - síndrome de Down. Essa patologia ocorre em 1 de 750 bebês e se manifesta em vários tipos de desvios no desenvolvimento físico e intelectual.
• Em segundo lugar na prevalência da síndrome de Klinefelter. Ele se manifesta como um atraso no desenvolvimento sexual na adolescência e ocorre em 1 dos 600 recém-nascidos do sexo masculino.
• Outra patologia genética diagnosticada em 1 de 2.500 crianças do sexo feminino é a síndrome de Shereshevsky-Turner. Na infância, esta doença faz-se sentir pelo aumento da pigmentação da pele, inchaço dos pés, mãos e canelas. Durante a puberdade, há uma falta de menstruação, a linha do cabelo sob as axilas e no púbico, também as glândulas mamárias não são desenvolvidas,

A cariotipagem é necessária não apenas para crianças com desvios visíveis, pois permite suspeitar de problemas genéticos e iniciar sua correção. A análise é entregue no centro médico-genético. Dependendo da idade da criança, o sangue pode ser retirado do calcanhar ou da veia. Se necessário, um geneticista pode exigir uma análise do cariótipo e dos pais.

Análise do cariótipo do recém-nascido

A triagem neonatal é a primeira análise realizada pelos recém-nascidos. O estudo é realizado na maternidade por 3-4 dias de vida, para bebês prematuros no dia 7. O cariotipagem precoce permite revelar anormalidades genéticas e distúrbios na estrutura do DNA antes do aparecimento de sintomas patológicos visíveis.

Para o diagnóstico precoce, use sangue do calcanhar do bebê. A pesquisa citogenética visa identificar essas patologias comuns entre as crianças como:

• A fenilcetonúria é uma doença hereditária caracterizada por uma diminuição da atividade ou pela ausência de uma enzima que cliva o aminoácido fenilalanina. Quando progredir leva a perturbações no cérebro e retardo mental.
• Fibrose cística - afeta as glândulas que produzem segredos, sucos digestivos, suor, saliva, muco. Causa uma ruptura no funcionamento dos pulmões e órgãos do trato digestivo. A doença é herdada.
• O hipotireoidismo congênito é uma lesão da glândula tireóide com produção insuficiente de seus hormônios. Isso leva a um atraso no desenvolvimento físico e mental.
• A síndrome adrenogenital é uma condição patológica na qual o córtex adrenal produz uma quantidade inadequada de hormônios. Por causa disso, o desenvolvimento dos órgãos genitais é interrompido.
• Galactesymia é uma patologia na qual a transformação de galactose em glicose é perturbada. O tratamento consiste na rejeição de produtos lácteos. Sem diagnóstico oportuno, pode causar cegueira e morte.

Se, de acordo com os resultados da análise do cariótipo no recém-nascido, forem detectados desvios ou anomalias, então um conjunto de estudos adicionais é realizado para esclarecer o diagnóstico. Esse diagnóstico precoce ajudará a identificar quaisquer problemas no corpo da criança em tempo hábil e iniciará o tratamento.

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Quanta análise é feita para o cariótipo?

A duração da pesquisa cromossômica leva de 10 a 21 dias. Quando os resultados estão prontos, depende do tipo de análise, isto é, com aberrações ou cariotipagem clássica.

A análise pronta para o cariótipo contém essas informações:

• O número de cromossomos.
• Existe alguma mudança na estrutura dos cromossomos?
• Há alguma violação na ordem do genoma?

Decifrar os resultados e sua interpretação é responsabilidade do geneticista. Se alguma anormalidade for detectada, o médico dará orientação médica para um diagnóstico adicional ou orientação sobre o tratamento.

Desempenho normal

Os cariótipos normais para humanos são 46, XX ou 46, XY. Por via de regra, a sua modificação ocorre nos primeiros estágios do desenvolvimento do corpo:

• Na maioria das vezes, o distúrbio ocorre durante o período de gametogênese (desenvolvimento pré-embrionário), quando as células sexuais parentais produzem o kyotype do zigoto. O desenvolvimento posterior de tal zigoto leva ao fato de que todas as células do embrião contêm um genoma anormal.
• A violação pode ocorrer nos primeiros estágios da divisão do zigoto. Neste caso, o embrião contém vários clones celulares com diferentes cariótipos. Isto é, o mosaicismo se desenvolve - a multiplicidade de cariótipos de todo o organismo e seus órgãos

Mudanças no genoma são manifestadas por várias patologias e vícios. Considere as anomalias cariotípicas comuns:

• 47, XXY; 48, XXXY - síndrome de Klinefelter, polissomia no cromossomo X em homens.
• 45X0; 45X0 / 46XX; 45, X / 46, XY; 46, X iso (Xq) - Síndrome de Shereshevsky-Turner, monossomia do cromossomo X, mosaicismo.
• 47, XXX; 48, XXXX; 49, XXXXX - polissomia no cromossomo X, trissomia.
• 47, XX, + 18; 47, ХY, + 18 - síndrome de Edwards, trissomia no cromossomo 18.
• 46, XX, 5p - síndrome do grito de catnip, deleção do braço curto 5 pares de genoma.
• 47, XX, + 21; 47, XY, + 21 - doença de Down, trissomia em 21 cromossomos.
• 47, XX, + 13; 47, ХY, + 13 - síndrome de Patau, trissomia no cromossomo 13.

A pesquisa citogenética visa determinar o estado dos filamentos de DNA, identificando defeitos e anomalias. Qualquer desvio dos índices normais é uma ocasião para um exame complexo do corpo.

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O dispositivo para análise

Para decifrar o cariótipo, o método de sequenciamento é usado. Esta técnica foi desenvolvida em 1970 e baseia-se na determinação da sequência de aminoácidos no DNA. Máquinas de sequenciamento usam reações enzimáticas cíclicas interativas com processamento adicional e comparação dos resultados obtidos.

Funções básicas de sequenciadores:

• Estudo completo primário de genomas desconhecidos, exoms, transcrições.
• Cariotipagem
• Paleogenética.
• Metagenômica e diversidade microbiana.
• Resequenciamento e mapeamento.
• Análise de metilação do DNA.
• Análise de transcrições.

No primeiro estágio, o aparelho cria uma biblioteca de seqüências aleatórias de fitas de DNA. Em seguida, cria um amplicon por PCR, que são usados como amostras. No estágio final, a estrutura primária de todos os fragmentos é determinada.

Os sequenciadores de última geração são totalmente automatizados e amplamente utilizados para análise genômica, minimizando a produção de resultados errôneos devido ao fator humano.

Interpretação dos resultados da análise no cariótipo

Interpretação dos resultados da pesquisa citogenética é feita por um geneticista. Por via de regra, a análise está pronta dentro de 1-2 semanas e pode se parecer com isto:

• 46XX (XY), são agrupados em 22 pares e 1 par de sexos. O genoma tem tamanho e estrutura normais. Anomalias não reveladas.
• O genoma está quebrado, mais de 46 cromossomos são detectados. As formas e tamanhos de um / vários cromossomos são anormais. Os pares do genoma estão quebrados / agrupados incorretamente.

Com relação às anormalidades patológicas no cariótipo, elas distinguem esses transtornos comuns:

• A trissomia é um cromossomo extra-somático. Síndrome de Down, Síndrome de Edwards.
• Monossomia é a perda de um cromossomo.
• Supressão é a ausência de um site genoma. -46, xx, síndrome do grito 5p-cat.
• Translocação é a transferência de uma seção do genoma para outra.
• Duplicação é a duplicação de um fragmento.
• Inversão - rotação de um fragmento de um cromossomo.

Com base nos resultados da análise do cariótipo, o médico faz uma conclusão sobre o estado do genótipo e o grau de risco genético. Nas menores mudanças na estrutura dos filamentos de DNA, um conjunto de estudos adicionais é atribuído. As aberrações identificadas podem não se manifestar, mas aumentam o risco do nascimento de crianças com anomalias genéticas.